Çözüm Reaktif Kiti

Cellamp Bütün Transkriptom Amplifikasyon Kiti (Gerçek Zamanlı), Ver. 2, gerçek zamanlı PCR ile analize hazır olan hücrelerden cDNA'ya gitmenizi sağlar. Eser miktarlarda nükleik asit ile çalışmak için geleneksel teknikler kullanırken, saflaştırma adımları sırasında ürün kaybı sık görülen bir sorundur. Bununla birlikte, bu hücreler-cDNA kiti iyi ürün verimi sağlar, çünkü RNA ve cDNA için kaybı indükleyen saflaştırma adımları gerekli değildir.

Prosedür, hücre lizisi ile başlar, ardından cDNA'yı mRNA'dan sentezlemek için DT adaptör primeri (RT DT primeri 2) ile ters transkripsiyon reaksiyonu ile başlar. Daha sonra, sentezlenen cDNA'ya bir DA kuyruğu eklemek için terminal deoksinükleotidil transferaz (TDT) kullanılır. Ortaya çıkan 3 'DA kuyruğu, cDNA ürünü içeren PCR için doğrudan şablon olarak kullanılır, bu da daha az gerekli amplifikasyon döngüsü ile sonuçlanır.

Hücrelerden cDNA'ya taşınmanın yanı sıra, bu ürün cDNA'yı eser miktarda RNA'dan yükseltmek için kullanılabilir.

Cellamp Bütün Transkriptom Amplifikasyon Kiti (Gerçek Zamanlı), Ver. 2, spesifik olmayan primerden türetilen amplifikasyonu baskılamaya yardımcı olan ve düşük ifade edilen genlerin verimlerini artıran ek bir eksonükleaz I tedavi aşaması kullanır

Cellamp Bütün Transkriptom Amplifikasyon Kiti (Gerçek Zamanlı) Ver. 2, az sayıda hücreden cDNA'nın doğrudan amplifikasyonuna izin verir. Amplifiye edilmiş cDNA, gerçek zamanlı PCR için bir şablon olarak kullanılabilir. Eser miktarlarda nükleik asit ile çalışmak için geleneksel teknikler kullanırken, saflaştırma aşamaları sırasında nükleik asit kaybı sık görülen bir sorundur. Bununla birlikte, bu kit iyi bir verim sağlar, çünkü RNA ve cDNA için kaybı indükleyen saflaştırma adımları gerekli değildir.