DNA Amplifikasyon Reaktif Kiti

AMPLI1 WGA Plus kiti, tek bir insan hücresinin toplam DNA içeriğinin dengeli ve tam amplifikasyonu için geliştirilmiş ve optimize edilmiştir.

Giriş DNA (~ 1 μi PBS içinde tek bir hücreden ve 1000 hücreye kadar) taze/canlı ve/veya sabit hücrelerden (PFA2, hücreler, Cellrescue tüpleri) türetilebilir. Kit ayrıca 10 ng'ye kadar genomik DNA'yı (örn. Doku veya FFPE örneklerinden) amplifiye etmek için de kullanılabilir.

Hücre lizisinden sonra DNA, bir kısıtlama enzimi ile sindirilir ve adaptörler DNA fragmanlarına bağlanır. Bu, genomdaki herhangi bir lokus için, karşılık gelen allellerin aynı uzunluk ve neredeyse aynı GC içeriğine sahip genomik fragmanlar olarak amplifiye edilmesini sağlar, böylece orijinal DNA moleküllerinin farklı amplifikasyon etkinliğinden dolayı alelik bırakma işlemini önemli ölçüde azaltır. Aynı tüpte gerçekleştirilen amplifikasyon, tüm fragmanlar için tek bir oldukça spesifik evrensel PCR primeri aracılık eder ve standart Taq DNA polimeraz üzerinde 6.5x daha fazla sadakat ile 3 '→ 5' eksonükleaz düzeltme aktivitesi ile bir DNA polimeraz kullanır.

AMPLI1 WGA protokolünün çıkışı, tüm genomu temsil eden yaklaşık 0.2‐2 kb'lik iyi dengelenmiş bir fragman kütüphanesidir.

Birçok farklı aşağı akış analiz prosedürü, Sanger tarafından varyant tespit veya yeni nesil sekanslama (NGS), mikrosatellit veya diğer PCR tabanlı genotipleme analizi, metafaz CGH, dizi CGH ve genom - kopya numarası analizi NGS tarafından benzerdir.

Illumina için iki özel aşağı akış kiti, AMPLI1 OnCoseek Paneli ve AMPLI1 LowPass Kiti,